Sale di cicloesilammonio del 5-bromo-4-cloro-3-indolil-beta-D-glucuronide CAS:18656-96-7

L'effetto del sale di cicloesilammonio del 5-bromo-4-cloro-3-indolil-beta-D-glucuronide (X-glucuronide) consiste nella sua capacità di produrre un precipitato blu o un cambiamento di colore in presenza dell'enzima beta-D-glucuronidasi. Questa reazione enzimatica si verifica quando il legame glicosidico tra il gruppo indolo e la porzione di acido glucuronico viene scisso dalla beta-D-glucuronidasi.

L'applicazione dell'X-glucuronide è principalmente in biologia molecolare ed enzimologia. Viene comunemente utilizzato come substrato per rilevare l'attività della beta-D-glucuronidasi. Alcune applicazioni specifiche includono:

Saggi con geni reporter: l'X-glucuronide viene spesso utilizzato come substrato nei saggi con geni reporter, in cui la beta-D-glucuronidasi funge da enzima reporter. Unendo la regione promotrice o la sequenza codificante di un gene di interesse al gene della beta-D-glucuronidasi, i ricercatori possono misurare l'espressione o l'attività del gene monitorando la formazione di un precipitato blu o un cambiamento di colore in seguito all'aggiunta di X-glucuronide.

Test di trasformazione batterica e di lievito: l'X-glucuronide può essere utilizzato per rilevare l'avvenuta trasformazione di batteri o lieviti con un vettore contenente il gene della beta-D-glucuronidasi. Le cellule trasformate che esprimono l'enzima possono idrolizzare l'X-glucuronide, producendo un cambiamento di colore visibile o un precipitato.

Colorazione istochimica: l'X-glucuronide viene utilizzato nelle tecniche di colorazione istochimica per visualizzare la presenza e la distribuzione dell'attività della beta-D-glucuronidasi nei tessuti o nelle cellule. Questa colorazione consente di localizzare e identificare le cellule che esprimono l'enzima.