Fenilgalattoside CAS:2818-58-8

Effetto sull'attività enzimatica: il fenilgalattoside è comunemente utilizzato per misurare l'attività dell'enzima β-galattosidasi.Quando il fenilgalattoside viene idrolizzato dalla β-galattosidasi, rilascia p-nitrofenolo.L'accumulo di p-nitrofenolo può essere misurato quantitativamente, fornendo informazioni sull'attività della β-galattosidasi.Questo effetto viene sfruttato in applicazioni quali test enzimatici e sistemi di screening.

Analisi dell'espressione genica: il fenilgalattoside viene spesso utilizzato come substrato negli esperimenti di biologia molecolare per studiare l'espressione genica.Il gene lacZ, che codifica per la β-galattosidasi, è comunemente fuso con sequenze regolatrici di altri geni di interesse.L'espressione del gene lacZ e l'idrolisi del fenilgalattoside da parte della β-galattosidasi possono indicare il modello di espressione e il livello del gene bersaglio studiato.

Sistemi di screening: il fenilgalattoside è un componente importante dei sistemi di screening che sfruttano l'attività della β-galattosidasi.Un esempio ampiamente noto è il metodo di screening blu-bianco, utilizzato per identificare le cellule ricombinanti o trasformate negli esperimenti di biologia molecolare.Le colonie che hanno assorbito con successo il DNA ricombinante o hanno subito una ricombinazione genetica esprimeranno la β-galattosidasi, portando all'idrolisi del fenilgalattoside e alla formazione di un colore blu.

Purificazione delle proteine: in alcuni casi, il fenilgalattoside può essere utilizzato come ligando per la cromatografia di affinità per purificare le proteine ​​che si legano specificamente o vengono attivate dalla β-galattosidasi.La proteina di interesse può avere un tag di affinità o un tag di fusione contenente un dominio legante la β-galattosidasi.Facendo passare la miscela proteica attraverso una colonna con fenilgalattoside immobilizzato, la proteina desiderata può essere trattenuta selettivamente e successivamente eluita.